Ошибка в тесте на антитела

Причиной ошибочных результатов тестов на антитела к SARS-CoV-2 может быть не только низкая чувствительность и специфичность систем, но и особенности конкретного организма и время сдачи анализа, рассказали опрошенные «Известиями» эксперты. Например, есть вероятность получить неверные результаты, если набор антигенов в тесте не попадет в набор антител конкретного человека. Кроме того, система может ошибиться, приняв антитела к другому веществу за искомые, или, наоборот, не распознать антикоронавирусные. Порой же организм вовсе не вырабатывает антитела к SARS-CoV-2, но у переболевшего появляется клеточный иммунитет, защищающий от COVID-19. Опрошенные «Известиями» специалисты дали советы, как снизить вероятность ошибки.

Добиться ответа

Есть несколько сложностей, сопутствующих тестированию на антитела, и они накладываются друг на друга, рассказали опрошенные «Известиями» эксперты. Во-первых, около 150 зарегистрированных в России тестов имеют различия. Во-вторых, набор антител, вырабатывающийся при встрече с коронавирусом, индивидуален для каждого переболевшего. Третья сложность заключается в том, что ученые не знают точный ответ на вопрос, какое время в организме переболевшего остаются антитела.

— Почти все из 150 зарегистрированных в России тестов основаны на детекции S-белка (части коронавируса. — «Известия»), — объяснил руководитель лаборатории геномной инженерии МФТИ Павел Волчков. — Производителей этих белков в мире не так уж и много. Остальные компании их покупают и делают свои тест-системы. Всё зависит от того, насколько качественно сделаны системы: больше или меньше они кладут этого белка. От этого зависит чувствительность теста.

Чувствительность и специфичность — основные характеристики систем, уточнил директор центра Genetico Артур Исаев.

— Первый показатель говорит о том, у какого количества переболевших пациентов система выявит антитела, — рассказал эксперт. — Если чувствительность теста низкая, он не выявит антитела, даже если они есть. Как правило, значения этого параметра в разных системах колеблются в пределах 93–99%. Если у человека есть антитела, но при одном тестировании они «не нашлись», второе тестирование, скорее всего, выявит их.

Иногда анализ дает ложноположительные результаты. Это может случиться потому, что организм успел «познакомиться» и выработать антитела к веществу, похожему на фрагмент SARS-CoV-2. Система может ошибиться и принять такие антитела за антикоронавирусные. Также вероятно, что в использованном тесте набор антигенов не попадет в набор антител конкретного человека.

— В структуре вируса SARS-CoV-2 выделяется несколько антигенов — структур, против которых организм начинает вырабатывать антитела, — пояснил врач-инфекционист «Инвитро» Андрей Поздняков. — Самыми «сильными» в плане ответа иммунной системы человека являются два: нуклеокапсидный и спайковый. Однако у части пациентов, перенесших подтвержденную коронавирусную инфекцию, обнаруживаются только IgG (класс антител. — «Известия») к спайковому антигену, у других пациентов — IgG к обоим антигенам (и спайковому, и нуклеокапсидному), а еще часть пациентов имеет IgG только к нуклеокапсидному антигену. Почему так происходит, пока неясно.

Случаи, когда у переболевшего есть антитела только к участкам S-белка или только к частям N-белка, скорее исключения из правила. Обычно, если человек встретился с коронавирусом, у него появляются антитела к его разным участкам.

Тесту — время

Даже если человек перенес COVID-19, антитела к моменту тестирования могли уже исчезнуть. Поэтому существует примерный промежуток времени, когда рекомендуют сдавать анализ. Впрочем, даже его соблюдение полностью не гарантирует правильного результата. Слишком индивидуальна реакция организма на COVID-19.

— Скорость выработки антител и скорость их распада у людей разная, и на это влияет много факторов. Клинически значимо то, что уровень антител превышает определенный показатель — это говорит о том, что гуморальный иммунный ответ есть, — пояснил специалист по лабораторной диагностике инфекционных заболеваний лаборатории «Гемотест» Дмитрий Гордеев.

При подозрении на COVID-19 нужно сдавать тест на антитела IgM к SARS-CoV-2, считают в «Инвитро». Это «молодые» антитела, которые иммунная система начинает вырабатывать в ответ на инфекцию. Причем неважно, в какой клинической форме проявляется болезнь и проявляется ли вообще. С предполагаемого момента заражения должно пройти не более двух недель.

Однако некоторые специалисты уверены, что этот анализ непоказателен.

— Тесты на антитела IgM часто дают ложноположительные результаты, — отметил Артур Исаев. — Сами антитела класса М не очень «специфичные» и обладают меньшим сродством к антигенам вируса, чем класс G. Поэтому тест может среагировать на иные антитела класса M, не имеющие отношения к SARS-Cov-2. Клинического значения этот тест не имеет: слишком высока вариация интерпретации результатов.

Если от предполагаемого момента заболевания прошло больше трех недель, лучше сдавать и IgM, и IgG. Последние антитела представляют собой «архив», где организм хранит информацию о перенесенной инфекции. Но особенность COVID-19 такова, что иногда оба типа антител обнаруживаются уже спустя три-четыре дня после появления первых симптомов или же, наоборот, выработка антител идет медленно. Бывает, что их нет вовсе.

Если от момента предполагаемой инфекции прошло больше трех месяцев, рекомендуют сдавать анализ только IgG. Тот же тест советуют, если человек не болел вообще, а просто хочет проверить возможный факт «встречи» с SARS-CoV-2 в виде стертой или бессимптомной форм.

Титр антител не слишком показателен, отметили эксперты. Лучше не пробовать делать по нему какие-либо выводы, а ориентироваться только на качественный результат теста: то есть ответ «да» или «нет».

Антитело не для тела

Не все антитела к SARS-CoV-2 могут нейтрализовать вирус, также обратили внимание специалисты.

— Например, нуклеокапсидные защитить не способны. Они направлены против внутренней структуры вируса и не могут помешать его проникновению в клетку, — сообщил Артур Исаев. — Зато антитела к участку S-белка, так называемому RBD-антигену, как раз защищают от вторжения SARS-CoV-2. Впрочем, не стоит забывать о Т-клеточном иммунитете — он тоже защищает организм.

Уничтожение вируса в организмах некоторых людей происходит за счет не антител, а другой части иммунной системы — Т-лимфоцитов, или Т-клеток. У большинства инфицированных эти клетки способны распознавать фрагменты вируса. Причем у людей, которые не болели COVID-19, тоже встречаются Т-клетки, которые реагируют на SARS-CoV-2. По мнению ученых, Т-клеточный ответ может наблюдаться из-за того, что активируются клетки иммунологической памяти на другие коронавирусы. Но есть и другая версия: такие люди перенесли COVID-19 бессимптомно.

Теоретически если анализ на Т-клеточный иммунитет подтверждает его наличие, то с точки зрения иммунологии он должен защищать человека при следующей встрече с SARS-CoV-2. Однако стоит такой тест порядка 20 тыс. рублей. Нацеленные на IgG системы обойдутся на порядок дешевле — примерно 1–1,5 тыс. рублей в частной лаборатории и бесплатно, если сдать анализ в поликлинике по ОМС.

Эксперты рекомендуют опираться не на показатели титров, а только на качественный результат — да или нет.

Тесты на антитела к коронавирусу могут показывать как ложноположительный, так и ложноотрицательный результат. Причины ошибок кроются не только в самих системах и их чувствительности, но и в состоянии организма человека. Об этом рассказали эксперты в интервью «Известиям».

Всего в России зарегистрировано 150 тестов, почти все реагируют на S-белок. От того, насколько качественно они сделаны, и зависит чувствительность. Если она низкая, то анализ может не выявить антитела, даже если они есть.

Иногда бывает ложноположительный результат, например, когда организм уже вырабатывает некие тела, похожие на фрагменты коронавируса. Система принимает их за антиковидные, хотя это не так. Также показатели могут быть неверными, если у пациента не совпадают выработанные иммуноглобулины с антигенами в тесте.

Многое зависит и от времени сдачи анализов. При подозрении на заражение нужно сдавать тест на антитела IgM, именно их вырабатывает организм в первые дни борьбы с инфекцией. Если с момента заболевания прошло три недели, стоит сдать IgM и IgG, а спустя три месяца — только на IgG. Этот же анализ можно сдать тем, кто не болел, для выявления скрытой или бессимптомной формы.

Эксперты рекомендуют опираться не на показатели титров антител, а только на качественный результат — да или нет. Кроме того, некоторые люди защищены Т-клеточным иммунитетом. Тест на него стоит около 20 тысяч рублей, в то время как анализ на иммуноглобулины можно сдать бесплатно по полису ОМС или в частной лаборатории за 1,5–2 тысячи рублей.

В медицине есть такое понятие — «ложноположительный результат». Его получают, когда анализы показывают, что пациент болен, а на самом деле никакой болезни нет. Случается это редко, но никому не хочется попасть в тот самый небольшой процент, особенно когда речь идет о таком серьезном заболевании, как гепатит C.

В каких случаях возможны ошибки, и почему они происходят? Для начала разберемся, как диагностируют вирусный гепатит C.

Что такое скрининг на гепатит C, и как проверяют его результаты?

Существует семь типов вирусов, способных вызывать инфекционный гепатит. Проблема в том, что установить правильный диагноз на основании симптомов невозможно. Для того чтобы точно сказать, какой вирус вызвал воспаление в печени, врач должен назначить лабораторные исследования.

Для выявления вирусного гепатита C используют два вида анализов крови:

• Выявление антител, которые собственная иммунная система человека вырабатывает в ответ на вирус (Anti-HCV), как правило, при помощи иммуноферментного анализа.
• Обнаружение РНК вируса при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР).

ПЦР — метод довольно дорогой, назначать его всем подряд нецелесообразно. В качестве скринингового теста назначают анализ на антитела Anti-HCV. Он более дешевый и доступный, но дает ложноположительный результат в 10–15% случаев. Поэтому положительный результат такого анализа всегда нужно подтверждать при помощи ПЦР-теста на РНК.

Почему же может «соврать» анализ на антитела? Возможных причин несколько.

Был болен, но выздоровел

Вирус гепатита C способен вызывать тяжелую болезнь не у всех людей. Примерно в 25% случаев организм инфицированного человека избавляется от возбудителя самостоятельно. В итоге вируса уже нет, а антитела против него — есть. Анализ выявляет их, а во время последующего ПЦР-теста результат оказывается отрицательным.

Такие люди здоровы, риск того, что они кого-нибудь заразят, практически равен нулю, у них не повышен риск цирроза и рака печени, как у «настоящих» больных гепатитом C. Тем не менее, в данном случае результат анализа нельзя назвать ложноположительным. Ошибки не было. Вирус в организме побывать успел, антитела в ответ на него выработались.

Ложноположительные результаты на гепатит C

О ложноположительном результате можно говорить, когда человек не был инфицирован вирусом гепатита C, возбудитель никогда не был в его организме, но анализ на антитела Anti-HCV показывает положительный результат.

Происходит это чаще всего из-за того, что во время анализа в качестве «противогепатитных» ошибочно распознаются другие антитела, которые организм выработал в ответ на другую инфекцию или в ходе аутоиммунной реакции.

Ложноположительный результат на гепатит C возможен у людей, больных ОРЗ, ретровирусной инфекцией, малярией, герпесом, туберкулезом, склеродермией, рассеянным склерозом и некоторыми другими заболеваниями, перенесших вакцинацию от гепатита B, столбняка, гриппа.

Всем будущим мамам в самом начале беременности назначают скрининговый анализ на гепатит C, и он также может показать ложноположительный результат. Это случается из-за изменений, которые происходят в организме некоторых беременных женщин.

Иногда ложноположительные результаты могут быть связаны с ошибкой лаборатории.

Прояснить ситуацию поможет тест на РНК вируса, который либо подтвердит, либо опровергнет диагноз. С большей вероятностью — подтвердит, потому что ложноположительные результаты при анализе крови на антитела, хотя и встречаются, но не очень часто.

Бывают ли ложноотрицательные результаты?

В редких случаях анализ на антитела показывает отрицательный результат, хотя на самом деле человек уже инфицирован. Происходит это, как правило, в «период окна», когда вирус уже проник в организм, но иммунная система на него среагировать не успела, антитела пока еще не выработались. При гепатите C этот промежуток времени обычно составляет 4–6 недель.

Антитела не выявляются у людей с сильно ослабленной иммунной системой, например, у больных ВИЧ.

Ложноотрицательные результаты опаснее ложноположительных. При положительном результате теста на Anti-HCV перепроверку при помощи ПЦР производят всегда, а при отрицательном, скорее всего, её никто проводить не станет. Если результат был ложноотрицательным, и человек на самом деле болен, высока вероятность, что он снова попадет к врачу и сдаст анализы, лишь когда появятся выраженные симптомы. Лечение будет начато с опозданием.

В большинстве случаев (85–90%) правильный, достоверный результат удается получить на этапе скрининга. Гепатит C — серьезное заболевание, его не случайно называют «ласковым убийцей». Со временем он может привести к циррозу и раку печени. Если вы входите в группу повышенного риска — сдайте анализ, проверьтесь.

19.12.2019

Диагноз ВИЧ-инфекции не может быть установлен на основании одного результата анализа, так как в этом случае существует вероятность ошибки.

Ложноположительным результатом является положительный результат анализа на ВИЧ у человека, не инфицированного вирусом иммунодефицита. Получение такого результата анализа может привести к серьезным последствиям для пациента и ошибочным рекомендациям со стороны врача. Именно поэтому процесс диагностики ВИЧ-инфекции и постановка непосредственно диагноза подчинены очень строгому алгоритму, который не допускает ошибок.

Исследовать кровь на ВИЧ можно исключительно с помощью тестов, сертифицированных для применения в конкретной стране.
Двумя важными характеристиками всех тестов являются специфичность и чувствительность. Чувствительность теста отражает долю положительных результатов, которые определяет тест у пациентов, инфицированных ВИЧ. Специфичность же, наоборот, отражает долю отрицательных результатов теста у здоровых людей. Как правило, тесты на ВИЧ-инфекцию обладают высокой специфичностью – это значит, что может присутствовать очень малое количество ложноположительных результатов, и подавляющее большинство неинфицированных пациентов все же имеет отрицательный результата анализа. К примеру, если провести тестирование 1000 неинфицированных людей и будет получено 4 положительных результата, это говорит о специфичности теста 99,6% (996 достоверно негативных результата на 1000 протестированных человек).

Автор: врач Университетской клиники H-Clinic Коновалова Анастасия Александровна 

Медицинский редактор: руководитель Университетской клиники, к.м.н., врач-инфекционист Коннов Данила Сергеевич 

Возврат к списку

Специалисты медицинских лабораторий предупредили россиян, что из-за ряда ошибок при сдаче тестов на антитела к коронавирусу можно получить неточные данные. Чтобы этого избежать, необходимо сдавать количественные тесты на антитела в одних и тех же лабораториях, с использованием одинаковых тест-систем.

Эти количественные тесты показывают концентрацию антител. Также они позволяют оценить изменение их уровня в крови. А качественные тесты дают знать, есть ли у человека антитела к коронавирусу в принципе.

На данный момент в России используется 150 различных тест-систем на антитела к COVID-19. Все они различаются чувствительностью, а также возможностью количественной и качественной оценки уровня антител, используемыми антигенами, пишет РБК.

Сравнивать результаты, которые были получены в разное время при проведении одной и той же количественной методики, можно, чтобы проверить, насколько изменился уровень антител. При этом у каждой из тест-систем свои показатели измерения и значения. В связи с этим, чтобы сравнить результаты, нужно сдавать тест в одной лаборатории. Тогда проверка будет выполняться одинаковым методом при помощи реагентов от одного и того же производителя.

Кроме того, результаты качественных измерений сильно зависят от того, какие партии реагентов в исследованиях используются. Чтобы появилась возможность сравнивать значения от разных производителей и разных лабораторий, ВОЗ выпустила стандарт NIBSC 20/136. Теперь для производителей появилась возможность разработать тест-системы на его основе. Однако в России на данный момент нет подобных зарегистрированных систем.

А еще необходимо различать тесты на антитела, которые вырабатываются к разным антигенам, и тесты на разные классы антигенов. Так, тест на антитела класса IgM может показать острую фазу заболевания. А антитела класса IgG начинают вырабатываться только спустя несколько недель после перенесенного заболевания. Это означает, что у человека уже выработался иммунитет.

Ранее профессор-биотехнолог из Сколковского института науки и технологий Дмитрий Кулиш предупредил, что существует так называемый «длинный ковид». При его развитии у пациента наблюдается рост уровня антител IgM при одновременном сохранении прежнего уровня IgG. В таком случае, по его словам, необходимо сразу бежать к врачу. Оперативные меры лучше принять даже в том случае, если человек с высоким уровнем IgM чувствует себя хорошо и занимается привычными ему делами.

Читайте также «Врачи объяснили необходимость вакцинации: «Пушечное мясо коронавируса»